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Pure系统以更大的回收率
纯化根茎川芎提取物中的阿魏酸
Pure 应用
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介绍
药用植物是药物开发的重要资源。在生物化学，制药及临床研究中通常会分析它们的复杂成分及生物活性成分。众所周知，阿魏酸是在根茎川芎中发现的最主要的生物活性成分「1」。使用 Pure Flash 色谱系统分离纯化该植物提取物，并鉴定其中的稀有成分。
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实验条件
萃取条件 | ||
萃取类型 | 研磨 | |
重量 | 2g | |
萃取溶剂 | 乙醚 | |
溶剂体积 | 40ml | |
超声波提取 | 20min | |
Flash 色谱条件 | ||
色谱柱 | Slica 12g | |
进样模式 | 液体 | |
溶剂A | 正己烷 | |
溶剂B | 乙酸乙酯 | |
UV1 | 280nm | |
UV2 | 254nm | |
流速 | 25ml/min | |
ELSD载气 | 空气 | |
柱平衡 | 3.0min | |
流动相条件 | ||
步骤 | 时间 | %B |
1 | 0.0 | 0 |
2 | 3.0 | 5 |
3 | 8.8 | 5 |
4 | 0.5 | 6 |
5 | 2.6 | 33 |
6 | 5.2 | 98 |
7 | 2.6 | 98 |
Flash 分离结果 |
▲ 图1：对根茎川芎提取物的分离说明使用紫外检测器和蒸发光散射检测器可以对峰进行检测。
分析型 HPLC 色谱条件 | ||
色谱柱 | AlltimaTM 硅胶柱,5μm,250×4.6 mm | |
进样模式 | 液体 | |
溶剂A | 正己烷+1%甲酸 | |
溶剂B | 乙酸乙酯+1%甲酸 | |
UV1 | 280nm | |
流速 | 1.0ml/min | |
流动相条件 | ||
步骤 | 时间 | %B |
1 | 0.0 | 0 |
2 | 10.0 | 50 |
3 | 20.0 | 100 |
分析型 HPLC 分离结果 |
▲ 图2：阿魏酸回收率 =97%(用峰面积来计算)
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结论
使用高灵敏度的 Pure Flash 色谱系统，对低含量植物萃取物中的重要成分进行分离和收集。在同一运行过程中，可以使用 UV 检测器检测发色团的峰和 ELSD 技术来检测非发色团的峰，进行馏分收集和进一步分析。这样可以纯化天然产物提取物中的化合物和不容易用传统 Flash 色谱系统检测的低含量的有药效的化合物。
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参考文献
Chen, X.; Kong, L.; Su, X.; Fu, H.; Ni, J.; Zhao, R.; Zou, H.; Separation and identification of compounds in Rhizoma chuanxiong by comprehensive two-dimensional liquid chromatography coupled to mass spectrometry; J. Chromatograpy A, 1040, (2004), pp. 169-178.
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