复纳科学仪器(上海)有限公司
    Confocal.nl 加入:复纳科技生物显微成像再添“成像利器”

    在生命科学领域,复纳科技始终致力于为国内科研用户引入全球顶尖的前沿技术。我们提供“超微结构解析”与“活体深层动态”的成像解决方案。


    如今,复纳科技的显微成像产品矩阵再添新成员——来自荷兰 Confocal.nl 的重扫描(REscan)共聚焦显微镜。该产品具备低光毒性、高分辨高速、深度成像三大核心优势,是活细胞长时程观察、类器官三维成像等应用场景的科研利器。


    一关于 Confocal.nlConfocal.nl 

    由埃里克・曼德斯(Erik Manders)和彼得・德伦特(Peter Drent)于 2016 年创立,致力于为研究人员提供共聚焦成像解决方案并提升其成像体验。Confocal.nl 的核心技术源于 Erik 团队开发的重扫描共聚焦技术(REscan Confocal Microscopy)。


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    与传统的共聚焦显微镜制造商不同,Confocal.nl 重扫描共聚焦显微镜是一种采用模块化设计的激光扫描共聚焦系统,该模块用于将宽场显微镜升级为共聚焦显微镜,可根据客户的现有配置和需求进行灵活定制(也可为客户提供整套激光共聚焦系统解决方案)。


    二REscan 技术

    传统的共聚焦显微镜依赖针孔(Pinhole)阻挡非焦面杂散光,以获得光学切片能力。然而,针孔越小,信号损失越严重,图像信噪比随之下降——这是一个长期困扰业界的“取舍难题”。


    2013年,Giulia M.R. De Luca等人在《Biomedical Optics Express》上首次提出了重扫描(REscan)技术。其核心在于解耦放大——将图像放大倍率与光点尺寸分离。


    工作原理分为两步:

    1.第一次扫描(传统共聚焦部分):激光扫描样品,激发出的荧光信号通过共聚焦单元的针孔。这一步保证了优异的轴向分辨率(光学切片能力),同时过滤了杂散光。


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    2.第二次扫描(重扫描单元):通过针孔的光线进入重扫描器,被以双倍的幅度再次扫描,并投射到高灵敏度的面阵相机(如sCMOS)上。


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    这一过程带来两个关键效果:相邻的两个荧光分子在相机上的距离被拉大一倍;同时每个分子的发光点因“拖曳”效应而略微变宽。最终结果是两个分子之间的距离增加得比光点变宽的速度更快,使得它们更容易被区分开,实现了分辨率的提升,横向分辨率可以提升约 1.4 倍。


    REscan 技术的核心优势:

    • 高分辨率 2D/3D 成像:可实现快速、深度的高分辨率成像,揭示样本的更多细节

    • 高灵敏度与信噪比:分辨率提升不依赖于缩小针孔,使得更多荧光信号被保留下来,配合高量子效率的相机,信噪比远高于传统共聚焦,能够捕捉到更微弱的信号。

    • 实时成像:图像在采集时就已经是超分辨,无需额外的计算重构时间,因此更适用于动态过程的观察。

    • 低光毒性:在获取高质量图像的同时,将光毒性降至最低,确保样本的活性与完整性,更适合长时程观测样本。


    三产品介绍

    为了满足不同应用场景的需求,Confocal.nl推出了两款核心产品,均搭载了专利的 REscan 技术,但分别基于点扫描和线扫描架构。


    1. GAIA 超分辨率点重扫共聚焦显微镜

    GAIA 是 Confocal.nl 推出的点扫描超分辨率共聚焦系统,得益于专利的 REscan 技术,仅需几纳瓦的功率即可实现超越衍射极限的深度成像,成像温和,适合长时程的活细胞超分辨成像。


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    核心特点:

    • 超分辨率成像:实时分辨率 170 nm,解卷积后可达 120 nm

    • 成像温和:仅需极低的激光功率,适合长时间活细胞超分辨率成像

    • 可变针孔:搭配电动可变针孔,确保在各种物镜下均可达到完美共焦

    • 灵活配置:可作为模块升级现有宽场显微镜,也可整套购买


    2. AION 大视场深层高速线重扫共聚焦显微镜

    与传统的点扫描共聚焦不同,AION 采用狭缝针孔(slit pinhole)替代普通针孔(pinhole),其激发光以“棒”状(bar)快速扫描样本,结合面阵检测器阵列(sCMOS),可实现极高速度的线性成像。依托于独特的扫描方式,AION 拥有媲美转盘式共聚焦的扫描速度,且视场更大、成像深度更深。


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    核心特点:

    • 深层成像:最高可达 900 μm 成像深度,且不会引起转盘式共聚焦的针孔串扰现象

    • 超快成像:扫描速度 >100 fps @ 3K × 3K;12 分钟即可完成 4 个位置、10个 Z 轴、96 个孔位的 4 色成像

    • 超大视场:远高于传统共聚焦,最大支持 FN 29

    • 可变针孔:唯一拥有 6 个电动可变针孔的高速共聚焦系统

    • 低光毒性:显著降低光毒性和光漂白,适合长时间活细胞成像

    • 灵活配置:可作为模块升级现有宽场显微镜,也可整套购买


    四产品应用

    Confocal.nl 的重扫描共聚焦系统凭借其低光毒性、高分辨高速、深度成像的独特优势,已广泛应用于细胞生物学、神经生物学、发育生物学、植物生物学等研究领域。


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    细胞生物学


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    类器官成像


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    神经生物学


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    植物生物学


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    超分辨成像


    参考文献

    [1] Luca, G. M. R. D. ,  Breedijk, R. M. P. ,  Brandt, R. A. J. ,  Zeelenberg, C. H. C. , &  Manders, E. M. M. . (2013). Re-scan confocal microscopy: scanning twice for better resolution. Biomedical Optics Express, 4(11), 2644-2656.

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