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动物细胞破碎技术和高速胶体磨的解决办法 ,细胞破碎技术,多糖提取 ,组织匀浆
细胞破碎技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。结合重组DNA技术和组织培养技术上的重大进展,以前认为很难获得的蛋白质现在可以大规模生产。
由于细菌、酵母、真菌、植物都有细胞壁,但成分不同,且同类细胞结成的网状结构不同,因此其细胞壁的坚固程度不同,总体呈现递增态势。
动物细胞虽没有细胞壁,但具有细胞膜,也需要一定的细胞破碎方法来破膜,达到提取产物的目的。
细胞破碎的方法主要分为化学法和机械法两大类。具体如下:
化学法
渗透冲击破碎法
• 方法:渗透压冲击是较温和的一种破碎方法,将细胞放在高渗透压的溶液中(如一定浓度的甘油或蔗糖溶液),由于渗透压的作用,细胞内水分便向外渗出,细胞发生收缩,当达到平衡后,将介质快速稀释,或将细胞转入水或缓冲液中,由于渗透压的突然变化,胞外的水迅速渗入胞内,引起细胞快速膨胀而破裂。
反复冻融法
• 方法:将细胞放在低温下冷冻(约-15℃),然后在室温中融化,反覆多次而达到破壁作用。由于冷冻,一方面能使细胞膜的疏水键结构破裂,从而增加细胞的亲水性能,另一方面胞内水结晶,形成冰晶粒,引起细胞膨胀而破裂。对于细胞壁较脆弱的菌体,可采用此法。
酶溶破碎发法
• 方法:利用各种水解酶,如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶、半纤维素酶、脂酶等,将细胞壁分解,使细胞内含物释放出来。有些细菌对溶菌酶不敏感,加入少量巯基试剂或8摩尔尿素处理后,使之转为对溶菌酶敏感而溶解。
• 特点:
a) 此法适用多种微生物
b) 具有作用条件温和
c) 内含物成分不易受到破坏
d) 细胞壁损坏的程度可以控制
• 存在的问题:
a) 易造成产物抑制作用
b) 溶酶价格高
c) 酶溶法通用性差
化学试剂法
• 方法:某些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内含物有选择地渗透出来。SDS(十二烷基磺酸钠)是典型的阴离子表面活性剂
• 特点:提取核酸时,常用此法破碎细胞。
• 存在的问题:
a) 时间长,效率低;
b) 化学试剂毒性较强,同时对产物也有毒害作用
通用性差:某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。
方法 | 技术 | 原理 | 效果 | 成本 | 应用 |
化学法 | 渗透冲击 | 渗透压破坏细胞 | 温和 | 便宜 | 动物组织均质物或细胞悬液 |
酶消化法 | 细胞壁被消化,使细胞破碎 | 温和 | 昂贵 | 细菌或酵母 | |
增溶法 | 表面活性剂溶解细胞壁 | 温和 | 适中 | 动物或植物组织均质物,提取DNA | |
脂溶法 | 有机溶剂溶解细胞壁并使之失稳 | 适中 | 便宜 | 动物或植物组织均质物,提取DNA | |
碱处理法 | 碱的皂化作用使细胞壁融解 | 剧烈 | 便宜 | 菌液质粒DNA提取,RNA提取 |
一般企业是多破碎,先物理破壁,然后化学冻融来组合破壁提高收率
由于 动物 一般是 分级破碎,
目前市场上大多数的胶体磨厂家生产出来的胶体磨转速只能达到3000rpm左右,当然我所说的都是指工业化的胶体磨机。对于实验室小型胶体磨机,由于电机(220V),轴等因素转速可达30000rpm左右,但是这种实验室胶体磨无法对应放大到生产中,所以在这里不做重点讲诉。
3000转胶体磨的结构大都都是直连电机,胶体磨机的主轴和电机直连,电机就决定了主轴的转速。而进口胶体磨采用分体式结构,通过皮带进行变速,XX设备由于结构的设计缺失、机械密封技术的不足的原因,以及改进后成本大幅度的提高问题,一直无法实现高速胶体磨机的自主研发和生产。
当用我们的设备好处是什么?效果好(研磨效果、均质效果、分散效果、乳化效果……),速度快,效率高。每一台设备都具有多功能改装,根据不同的要求更换不同的模块。还有什么???那就是能耗低,据用过依肯的设备客户反应,就电费就能省下不少。如何去选择一台合适的设备,一定会做一个明智的选择!
在线式高速胶体磨优点
1 CMS2000系列作为一个用于混合分散粉碎工艺的设备,其具有连续式性操作,因此也被称作连续式超高速粉碎机,能够更好满足大批量连续化生产作业要求.
1分散乳化粉碎效率高:批次乳化机在进行乳化前往往需要预搅拌,在其基础上才能实现较好的分散乳化混合效果.因此所需要时间更多,产量更小.适用于不连续生产或者产量较小的生产.而连续式胶体磨机可以直接进行投料,更短时间能够实现混合分散的颗粒经的要求.产量大效率高,适用于连续式生产,产量更大的情况.
2分散效粉碎果好:其他粉碎设备在罐体内,物料与粉碎头较松散,工作时依靠强大的吸力使物料进入分散头中,不能实现足够小的颗粒经要求。而连续式乳化机由于乳化腔体内部设计足够小,胶体磨头与物料紧密接触,剪切充分,同时胶体磨腔体设计成多层转定子咬合结构,优化粗齿结构,可以满足混合乳化粉碎的颗粒经分布较窄,效率更高
3 技术功能指标更高:CMS2000系列管线胶体磨机比较在相同的马达情况下,转速有明显优势,CMS2000转速可以达到14000RPM,可以在更短的恶时间内处理更多符合要求的物料,能够为大批量生产的企业实现生产过程的成本降低。