1脂质体粒径控制的重要性

纳米脂质体 (nanoliposomes) 是一种具有类细胞膜磷脂双分子层的纳米囊泡体，因为磷脂层与细胞膜的结构类似，可以与细胞膜融合，从而将药物送入细胞核中。脂质体载体独特的释药机制，使其不但可以增加药物溶解度，还具有潜在的缓释或靶向特性，广受研发人员的青睐，全球范围内已有 10 余种注射用脂质体产品获批上市。

纳米药物与其他药物一样，必须具有安全性、可控性与有效性，有效性是纳米药物实现疾病治疗的基础。脂质纳米注射剂经给药在体内运转时，需要克服多重生理/病理屏障，才能安全到达靶点发挥治疗作用，在发挥其药效前需要克服血液、组织、细胞和细胞器等多重屏障[1]。通过调控纳米药物本身的物理化学性质，如纳米药物的大小、形状、表面电荷等，一定程度上能够克服药物递送障碍[2]。

相比于传统注射剂，脂质体具有靶向作用，可减轻药物的毒副作用，机体器官对不同粒径微粒的阻留能力不同，可通过脂质体注射剂的粒径控制实现药物被动靶向效果[3]。脂质体粒径小于50nm时一般都能够靶向至脾组织；在50~100nm时能靶向至肝组织；在0.1~0.2μm时能够靶向至肝组织肝巨噬细胞的溶酶体；在7~12μm时可被肺组织细胞摄取；＞12μm时能够被毛细血管上皮细胞摄取进而到达荷瘤组织内；＞15μm时能被肠系膜动脉等血管上皮细胞摄取[4]。

脂质体的粒径直接影响药物的释放、生物利用度、载药量、靶向性等，在制备时应控制粒子的大小，获得较窄且均匀的粒度分布。

奥法美嘉平台提供整套的脂质体的表征及解决方案，可用于快速评估、优化脂质体的配方和工艺：PSI高压微射流均质机对脂质体进行制备和粒径控制、Nicomp粒度分析仪分析平均粒径及Zeta电位的检测、AccuSizer颗粒计数器分析大粒子浓度，Lumispoc颗粒计数器分析小粒子浓度、Lum稳定性分析仪快速分析脂质体的稳定性，Entegris-ANOW滤芯过滤杂质及大颗粒。

2脂质体制备流程概述

在脂质体的制备方法中有多种制备方法，传统的方法如：薄膜水化法、溶剂注入法、逆向蒸发法等。这些方法几乎都是先将脂质溶解在有机溶剂中，然后再去除有机溶剂。另外，也有大量的非传统制备方法用于研究，如超临界流体(supercritical fluid, SCF)、微流体技术、冷冻干燥法。此处，介绍一种脂质体的制备流程，见图1，通过传统方法制备粒径比较大的粗脂质体，在除去有机溶剂后，再通过微射流均质的方式进一步降低粒径及进行整粒；而后通过超滤进行纯化，得到粒径均一、满足使用安全要求的脂质体。脂质体的平均粒径和粒度分布是脂质体药品关键质量特性，显著影响其体内行为。溶解磷脂可能需要用到毒性比较大的有机溶剂，溶剂残留需要符合ICH相关规定，除去可能存在困难。超滤是影响粒径和溶剂残留的关键工艺，也是达到控制的最后一步工艺。[5]

图1 脂质体制备与表征流程图

3脂质体粒度控制

脂质体给药系统属于非均相热力学不稳定系统，脂质体在制备过程中，若粒径大小及分布不合格，则会影响产品后续质量问题。粗脂质粒需要经过高压均质或微射流进行整粒，而后进行超滤纯化，得到粒径均一的脂质体。高压微射流均质机具有大规模、连续化生产等特点，通过高速撞击、剪切与空穴作用达到均质与细化的目的，现已有用于制备阿糖苷、中链脂肪酸、茶多酚及维生素C等纳米脂质体的实例。[6]

高压微射流均质机

PSI-20高压微射流均质机（小试兼中试型）采用固定结构的均质腔，通过电液传动的增压器使物料在高压作用下以极大的速度流经交互容腔的微管通道，物料流在此过程中受到高剪切力、高碰撞力、空穴效应等物理作用，使得平均粒径降低、体系均一稳定，由此获得理想的均质、分散、去团聚的结果。

图2 PSI高压微射流均质机