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猴痘病毒与超离纯化

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鉴于刚果民主共和国和越来越多的非洲国家出现猴痘病例激增现状。世界卫生组织8月14日宣布,猴痘疫情构成“国际关注的突发公共卫生事件”(上一次是新冠)。


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猴痘的主要传播途径和症状1


从2022年起,在我国多个省份也先后报告多例猴痘病例。2023年7月26日,国家卫健委发布《猴痘防控方案》。让我们一起来解读一下该方案中一些我们关心的重点问题:


Q 什么是猴痘病毒?

A 与天花病毒同属正痘病毒属。1958年在猴子中发现该病毒。1970年首例确诊人类病例。


Q 猴痘的传染源是什么?

A 目前认为非洲啮齿类动物可能为其自然宿主。传染源包括猴痘病例及感染的啮齿类动物、猴和猿等灵长类动物。


Q 猴痘病毒传播途径?

A 主要通过直接接触病变皮肤或黏膜传播,亦可通过被病毒污染的物品和飞沫传播,接触感染动物的呼吸道分泌物、病变渗出物、血液及其它体液,或被感染动物咬伤、抓伤感染传播。


Q 临床症状有哪些?

A 通常包括皮疹和黏膜疹,常见症状包括发热、头痛、背痛、肌痛、淋巴结肿大等。


Q 病程及严重程度?

A 猴痘为自限性疾病,一般病程约2—4周,大多数病例症状会自行消失,重症和死亡主要为儿童、孕妇和免疫力低下人群,死率约为0.1%。


实验室如何分离猴痘病毒?

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猴痘病毒电镜图片


早在2022年9月报告了首例从中国大陆输入的猴痘(MPX)病例时。中国疾病预防控制中心就成功使用超速离心分离和富集了培养后的猴痘病毒2


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密度梯度离心精纯猴痘病毒颗粒示意图


如果只是简单的富集病毒,那么常规的超速差速离心沉淀就可以2。如果要获得高质量的病毒样品进行后续研究,那么可以考虑加一步蔗糖密度梯度离心3,4。这里推荐水平转子(例如SW 41、SW 32)来进行离心,保证获得更好的病毒条带。


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离心过程中的潜在安全风险


由于猴痘等病毒的纯化往往具有极大的生物安全隐患。因此需要对于离心过程进行严格控制。Beckman Optima系列超速离心机提供从主机——转子——耗材全流程的离心生物安全解决方案。


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耗材

一次性快封管,通过无线热封器可以达到完全密封,避免样品漏出。


转子

转子盖在真空中形成密封,防止泄漏,可以不开盖的情况下,整体的移动转子,在安全处再打开,转子也可整体灭菌处理。


主机

两组HEPA过滤器分别置于空气流入口和流出口,高效去除气溶胶中的病毒颗粒,超速离心时防止气溶胶外溢。


参考文献:1. Monkeypox virus (MPXV): A Brief account of global spread, epidemiology, virology, clinical features, pathogenesis, and therapeutic interventions. 20232. Isolation and Characterization of Monkeypox Virus from the First Case of Monkeypox — Chongqing Municipality, China, 2022 3. Retrospective Analysis of Monkeypox Infection.4. Comparative Proteomics of Human Monkeypox and Vaccinia Intracellular Mature and Extracellular Enveloped Virions

贝克曼库尔特生命科学  2024-08-30  |  阅读:496
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