导读：

目前禽流感的防控主要依靠灭活疫苗免疫按种，而白油佐剂被广泛的应用在禽用灭活疫苗的生产中.白油佐剂的质量也直接影响着疫苗的免疫效果，劣质矿物油甚至能造成鸡群的生产性能下降.发病 和死亡，而优质的佐剂可以保证疫苗的质量稳定;使鸡群产生较高的抗体.形成较长的保护期，且注射方便省力。因此.通过研究选择优质的白油佐剂与乳化机頻率的探讨对禽用油乳剂灭活疫茁的生产和使用具有重要的理论和实践意义.

一材料与方法

1.主要材料

重组禽流感病毒(H9N2亚型，JY株)原液，由哈药集团生物疫苗有限公司提供，禽流感病毒由H9亚型HI试验抗原，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供,21 – 28日龄SPF 鸡，由山东济南斯帕法斯家禽有限公司提供• SPF种蛋，哈药集团生物疫苗有限公司自行孵化出雏饲养所需日龄。

2.主要试剂。

国内外四个不同企业的白油编号为A. B, C、D.

3.主要仪器与设备

普通恒温培养箱、干热灭菌箱、八道数字式可调微址移液器.Tip头.禽用负压隔离器、孵化器、水平层流净化工作台、乳化机、黏度计、微量放血凝板. 微量振获器等。

4.试验方法

选择国内和国外四家白油A，B, C.D)，并与乳化工艺中乳化机的三种频率(30HZ，40HZ，50HZ)做交叉试验，共制备出12种不同的配比试验产品(表1 > • 根据兽用生物制品生产和检 验规程，分別进行性状检验.无菌检验、安全检验和效力检验，根据结果综合评定用禽流感j y株的最优白油佐剂及乳化机频率•

二、结果与分析

1.性状检验

12个样品交叉试验结果外观均为乳白色乳状液，油包水剂型，黏度测定B-40值最低，检验结采均合格(见衣2>, 但D-30 组表现粘度明显高于其他白油所乳化的疫苗，在动物免疫时.可能会造成注射费力，吸收缓慢，应激增大, 抗体低下，

2.无菌检验。

交叉试验的12个样品，经TG小瓶3d后移植，TG、 CA. GP培养7d后无菌检验结果均为阴性，无菌生长(表略)。

3.安全检验。

交叉试验的12个样品的免疫鸡只免疫后14d全部健活，且没出现由因疫苗引起的局部和全身不良反应(犮略h

4.效力检验。

效力检验结果：

A—30 为 8 • 5 log2，B—30 为 8 • 7 log2 •

C-30 为 8.71og2,D-30 为 8.4 Iog2.

A-40 为8.91og2, B-40为9.11og2.

C-40为8.81og2. D-40为8_5tog2,

A-50为8.81og2. B-50为9.01og2,

C-50 为 8.81og2,D-50 为 8.61og2,

均达到国家标准：免疫鸡HI抗体效价均高于1：64 (61og2),对照鸡HI抗体效价均低于 1 ：4 (21og2)(表略)。最终确定B-40为最优组合.乳化机频率为40HZ。