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摘要:
以红鱱鱼为原料,使用Biochrom30+全自动氨基酸自动分析仪对其肌肉的氨基酸组成进行分析。结果表明红鱱鱼肌肉中氨基酸总量的质量百分比为16558.3mg/100g,必需氨基酸(不含色氨酸)占氨基酸总量的39.78%,鲜味氨基酸占氨基酸总量的39.09%。
样品前处理
1、所用试剂
1、1 浓盐酸,浓度≥36%,优级纯
1、2 6mol/L 盐酸:取500mL 盐酸加水稀释至1000mL,混匀。
1、3 水:去离子水
1、4 苯酚:须重蒸
1、5 17种氨基酸标准品
前处理设备
1. 分析天平:感量分别为 0.0001g和0.00001g。
2. 水解管:耐压螺盖玻璃试管,体积为25mL
3. 匀浆机。
4. 无油真空泵
5. 干浴水解浓缩仪
6. 移液管
7. 0.22um滤膜
样品制备(参考国标GB 5009.124-2016)
原料鱼手工去除鱼鳞、鱼皮、鱼刺和内脏,采肉后清洗、沥干,在匀浆机中打成肉糜,于-18℃冰箱中冷冻保存,分析时取出解冻后使用。
试样水解
称取含蛋白7.5-25mg的试样,加入水解管中,加入15mL 6mol/L盐酸,继续向水解管内加入苯酚3滴~4滴。冷冻3min~5min,接到真空泵的抽气管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮气,重复抽真空-充入氮气3次后,在充氮气状态下拧紧螺盖。将水解管放入干浴水解浓缩仪中,110°C水解22-24h,冷却、混匀、开管、转移并定容到50ml容量瓶中,用移液管取适量样液,在干浴水解浓缩仪中50°C吹干,必要时加入少许水,重复吹干1-2次,加入3-5mL PH2.2的稀释上机用柠檬酸钠缓冲液溶解,振荡混匀后,吸取溶液通过0.22μm 滤膜后,转移至仪器进样瓶,为样品测定液,供仪器测定用。
分析方法描述(Biochrom 30+)
1) 色谱柱:Biochrom Na型阳离子交换树脂柱,4.6X20cm
2) 分离程序:
3) 运行时间:经分析时间+再生时间 57min
4) 反应单元温度:135°C。
5) 检测波长:570nm、440nm同时检测。
附、红鱱鱼分析图谱及做样结果
Biochrom 全自动氨基酸分析仪Biochrom 30+
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