目的:研究测定虎杖中大黄素的含量；虎杖属于蓼科虎杖属植物，干燥的根具有祛风利湿散瘀定痛止咳化痰功效，是传统中药，其化学成分复杂，所含有的主要成分大黄素具有抗肿瘤抗病毒抗菌抗炎平喘等作用。

方法:采用双波长薄层扫描法，波长扫描条件：硅胶G薄层板，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（15:2:1）为展开剂，双波长反射法锯齿扫描，λs=440nm，λr=660nm，线性参数为3，光束狭缝：2mm×2mm

结果: 点样量0.202ug-1.010ug,线性关系良好，Y=1424.926X+440.17,r=0.9992;平均回收率为98.04%，RSD=1.47%(n=6)

结论:方法简便准确，可用于本品质量控制

1 材料与仪器

1.1材料

1.11虎杖原药材:蓼科虎杖属植物的干燥根和根茎

1.12试剂:对照品:大黄素对照品 ，其余试剂均为分析纯

1.2 仪器Biostep- CD60 薄层扫描仪及分析软件;高效硅胶G薄层板，电子天平，5ul微量进样器，

2 方法

2.1实验条件

2.1.1 层析：薄层板：硅胶G预制板（10cm×20cm）,临用前110℃活化30min

      展开：甲苯-醋酸乙酯-甲酸（15:2:1）,饱和15min后展开，取出晾干自然光下检视为黄色斑点

2.1.2 扫描条件 双波长扫描法锯齿扫描，测定波长 λs=440nm,参比波长λr=600nm,线性参数为Sx=3，光束狭缝：2mm×2mm

2.2 对照品溶液制备：取大黄素对照品约5.05mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.2.2供试品溶液的制备

取虎杖粉碎过60目筛，称取约0.35g，精密称定，加蒸馏水30ml及盐酸3ml，加热回流2h，放冷；加氯仿回流提取2次，每次加氯仿50ml，回流1h，放冷，分取氯仿层；合并：酸水层置分液漏斗中，用氯仿提取三次，每次30ml，合并氯仿提取液，通过装有无水硫酸钠的漏斗，滤器用少量氯仿洗涤，洗液并入滤液中，回收氯仿，残渣加少量甲醇溶解，并用甲醇定容于10ml容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。

2.3方法学研究

2.3.1 线性关系:精密吸取对照品溶液2,4,6,8,10ul,点于同一硅胶G薄层板上，依上述条件展开后进行扫描测定。以其峰面积积分值为纵坐标，以点样量为横坐标，作图，得一条直线，回归方程：Y=1424.926X+ 440.17，r=0.9992.结果表明，大黄素在0.202-1.010ug范围呈现良好的线性关系。结果见表1

表1 　线性关系考察

2.3.2　稳定性试验   取样品2ul点于薄层板上，展开。每间隔15min测定一次，1h内测定5次，积分值分别为1547.28,1515.13,1508.27,1468.45,1513.32，RSD=1.66%,结果表明1h内稳定

2.3.3 精密度实验 取对照品6ul点于同一薄层板上，展开，将同一板上的5个点样量相同的点扫描，记录峰面积，积分值分别为1328.97,1316.54,1320.17,1332.54,1310.27，RSD=0.69%,结果表明，精密度良好。

2.3.4 重复性实验 取虎杖粉末5份，每份约0.37g，精密称定，按“样品溶液的制备”项下处理，取2ul点于薄层板上并测定，结果见表2，结果该批样品含大黄素1.05%，RSD=1.73%,说明重复性良好。

表2 重复性实验

2.3.5 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品共6份，各加入到大黄素对照品量3.0-4.5mg，按照“供试品液的制备”项下制备依法测定各试验液中大黄素的含量，结果见表3.结果平均回收率为98.04%，RSD=1.47%

表3 加样回收率试验