一、样品前处理

1、所用试剂

1.1 Loading Buffer：钠盐系统，pH 2.2

1.2 浓盐酸，浓度≥36%,优级纯

1.3 6mol/L 盐酸：取500mL 盐酸加水稀释至1000mL,混匀

1.4 水：去离子水

1.5 20种氨基酸标准品

2、前处理设备

1）分析天平:精度为 0.0001g

2）移液枪及枪头

3）一次性注射器及0.22μm滤膜

4）低范围pH试纸

5）真空干燥烘箱

6）无油真空泵

7）电热平板及称量瓶

3、样品制备（由客户提供的内部测试提取方法）

准确称取试样10.0g，加入0.1mol/L盐酸溶液500mL，搅拌3h，用饱和氢氧化锂溶液调节pH至2.2,用纯水转移定容至1000mL容量瓶中摇匀。取出适量后,离心机4000r/min离心20min。取中下层溶液过0.45μm滤膜，并取滤液1mL置于10mL容量瓶中，加入Loading Buffer稀释定容至刻度，摇匀，等待上机测试。

一、分析方法描述（Biochrom 30+）

氨基酸分析仪分析方法参数：

1）色谱柱：Biochrom Na型阳离子交换树脂柱，4.6x20cm

2）分离程序：

运行时间：经分析时间+再生时间171.45min

3）反应单元温度：135℃

4）检测波长：570nm、440nm同时检测

三、样品中氨基酸含量的计算

样品测定液氨基酸的含量按式(1)计算:

Ci = Cs/As × Ai × F…………………(1)式中:

Ci ——样品测定液氨基酸i的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);

Cs ——氨基酸标准工作液氨基酸s的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);

Ai ——试样测定液氨基酸i的峰面积;

As ——氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积;

F ——样品稀释倍数。

附：肠内营养粉剂样品中的氨基酸种类及其分析图谱、做样结果：

1. AA-PA