一、样品前处理
1、所用试剂
1、1 浓盐酸，优级纯
1、2 6mol/L 盐酸：浓盐酸与水1:1混合
1、3 水：去离子水
1、4 苯酚：须重蒸
1、5 19种氨基酸标准品
2、标样配置
氨基酸混合标准储备液：含有天冬氨酸、苏氨酸等17种常见组成蛋白质的氨基酸。
牛磺酸标准储备液：用PH2.2的柠檬酸缓冲液配置成2.5umol/L的储备液备用。
正亮氨酸标准储备液：用PH2.2的柠檬酸缓冲液配置成2.5umol/L的储备液备用。
璜基丙氨酸标准储备液：用PH2.2的柠檬酸缓冲液配置成2.5umol/L的储备液备用。
蛋氨酸砜标准储备液：用PH2.2的柠檬酸缓冲液配置成2.5umol/L的储备液备用。
羟脯氨酸标准储备液：用PH2.2的柠檬酸缓冲液配置成2.5umol/L的储备液备用。
鸟氨酸标准储备液：用PH2.2的柠檬酸缓冲液配置成2.5umol/L的储备液备用。
将17种氨基酸混合标准储备液、牛磺酸、正亮氨酸、璜基丙氨酸、蛋氨酸砜、羟脯氨酸、鸟氨酸及PH2.2的柠檬酸缓冲液按照1:1:1:1:1:1:1:3配置成0.25umol/L的标准品待用。
3、前处理设备
1) 天平
2) 水解管
3) 量筒
4) 无油真空泵
5) 干浴水解、浓缩仪
6) 移液管
7) 0.45um滤膜
4、样品制备（参考欧盟饲料指令98/64/EC ）
1、样品的准备
粉碎样品，通过0.5mm的筛孔。高水分的样品粉碎前必须低于50℃鼓风干燥或者冷冻干燥。高脂肪含量的样品粉碎前必须用轻质石油（3.12）脱脂。
2、氧化
从准备好的样品中称取约0.1~1克样品，准确到0.2mg，于100 ml带螺纹盖子的瓶子中，称取的样品应该含有大约10mg氮，水分不能超过100mg。将瓶子放于冰水浴中冷却至0℃，加5ml氧化试剂（过甲酸苯酚），用带弯头的玻璃刮勺混合。用空气密封膜将瓶子和刮勺一起密封，密封后一起放入0℃冰箱的冰水浴中，放置16小时。之后，从冰箱中取出，加0.84克偏重亚硫酸钠（3.4）来分解过量的氧化试剂。
3、水解
加入25毫升盐酸-苯酚溶液, 然后将反应瓶放在烘箱中，温度控制在110摄氏度，旋松帽子（防止玻璃瓶子破裂），水解1小时。然后快速旋紧瓶塞（戴手套和护眼罩）将其继续在烘箱110摄氏度下水解23小时。
4、加入内标并且调节pH值到2.20
当水解反应结束后，将反应瓶从烘箱中取出，并且打开瓶口（戴手套和护目镜）。冷却后用定量加样器准确加入15.00克(15毫升)正亮氨酸标准溶液，混合并且转移水解溶液到250毫升的塑料烧杯中。加入大约125毫升柠檬酸缓冲液和19毫升氢氧化钠水溶液,将实验烧杯放入到样品容器中用氢氧化钠水溶液将溶液调节到pH为正好2.20。转移一部分溶液（不需要全部）到50毫升有盖子的塑料瓶中。可以马上测定或者放入冰箱等到分析的时候测定。
二、分析方法描述（Biochrom 30+）
氨基酸分析仪分析方法参数：
1) 色谱柱：Biochrom Na型阳离子交换树脂柱，4.6X20cm
2) 分离程序：
3) 运行时间：分析时间65min
4) 反应单元温度：135°C。
5) 检测波长：570nm、440nm同时检测。
附、鱼料分析图谱及做样结果
