随着多参数流式细胞术（multi-parameterflowcytometry,MFC）的发展和完善，免疫细胞的精细化分型将在临床实践中发挥越来越重要的作用，在多个领域取得了显著进展，不仅提升疾病的诊断准确性，还能够指导治疗决策，改善患者预后。

MFC精细化分型的临床应用

MFC通过增加更多参数进行精细化分析，能够提供更加全面、立体的免疫细胞信息，具有重要的临床价值，主要包括以下几个方面：

疾病筛查与诊断

● 精细化分型有助于早期识别淋巴瘤及肿瘤前驱病变，包括癌前病变和癌前状态。

● 对于遗传性和免疫缺陷性疾病的诊断也提供了更为准确的基础。

疾病进程监测

● 精细化分析可以揭示良性和恶性疾病的发生、发展过程及其预后情况，与免疫细胞亚群的变化密切相关。

● 提供了动态监测疾病变化的能力，特别是在治疗前后对比个体的基础值时尤为重要。

特殊治疗后的免疫重建评估

● 在免疫治疗和造血干细胞移植等特殊治疗后，偏离规律性的免疫细胞亚群变化可能预示着疾病预后和并发症的风险。

● 精细分型能够帮助医生更好地理解患者的免疫恢复状况，优化后续治疗策略。

个性化医疗支持

● 通过精细化分型获得的详细信息，可以为每位患者制定个性化的治疗方案，提高治疗的有效性和针对性。

● 有助于建立更精确的个体化健康档案，跟踪长期健康趋势。

共识建议的免疫细胞精细化分型方案

在《中华预防医学》2023年11月第57卷第11期发表的《基于多参数流式细胞术精细化分析外周血免疫细胞亚群的中国专家共识》中建议的适用于贝克曼库尔特公司的流式细胞分析检测技术平台的精细化免疫细胞亚群8色方案如下，其他平台可根据这个方案适当调整。

Treg：调节性T细胞；DC：树突状细胞；TCR：T细胞受体；TCRVδ：T细胞受体δ链可变区；Th：辅助性T细胞；TRBC1：Ｔ细胞受体β链恒定结构域。FITC为异硫氰酸荧光素，PE为藻红蛋白，PE-Cy5.5为藻红蛋白偶联物，PE-CY7为藻红蛋白偶联物，APC为别藻青蛋白，APC-A750为别藻青蛋白偶联物，PB为太平洋蓝，KrO为科洛姆橙。

共识中方案的应用，解读文章如下：

免疫细胞精细分型重磅共识发布！世界免疫日，解码“免疫力”！

精细化分型参考范围

近日，《中华检验医学杂志》2024年12月第47卷第12期发表的《多参数流式细胞术精细化免疫细胞亚群参考区间的建立》的文章中，根据这一共识中的方案，完成了326名表观健康人免疫细胞亚群参考区间的制作，按照年龄分为18~40岁和41~60岁组，报告内容包括了T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞及DC细胞等不同类型的精细化亚群。

接下来我们一起来看一下具体的参考区间。

T淋巴细胞亚群参考区间范围

覆盖了常规T淋巴细胞亚群的大部分检测项目，分为按照表型分类、按分化状态分类、按活化及功能分类等几大类型的细胞亚群的相对计数和绝对计数参考区间。

初始T细胞在老年人中的比例明显下降，CD28的表达也出现显著降低，而在终末分化的记忆性T细胞中的CD57表达则出现增高。本研究中，与18~40岁组相比，41~60岁组人群CD4+初始T细胞和CD4+中心记忆T细胞等一些衰老相关亚群均出现了显著变化。

NK、DC、单核细胞及B细胞精细亚群

参考区间

包括B细胞亚群、NK细胞亚群、单核细胞亚群和DC细胞亚群中常用的检测群体的参考区间。文章研究得出，41-60岁组的成熟的NK亚群CD3‑CD56lowCD16+更高，而在18-40岁组中未成熟的NK亚群CD3‑CD56hiCD16‑更高。DC细胞包括pDC和mDC亚群，pDC占DC细胞比例参考区间为5.0%~38.1%，41~60岁组比18~40岁组的pDC占比更低。

这套通过多参数流式细胞的方法建立了T、B、NK、单核、DC等免疫细胞精细亚群的参考区间，为日常工作开展精细分型的检测提供了参考依据。大家在实际的开展中仍需注意不同仪器和试剂荧光素不同对结果的影响、实验室验证时应充分考虑年龄因素、注意与临床疾病应用的结合。

参考文献：

1.中国中西医结合学会检验医学专业委员会. 基于多参数流式细胞术精细化分析外周血免疫细胞亚群的中国专家共识[J]. 中华预防医学杂志, 2023,57(11):1729-1747. 

2．谷春,王斐,李楠楠,等. 多参数流式细胞术精细化免疫细胞亚群参考区间的建立[J]. 中华检验医学杂志,2024,47(12)：1411-1418.